cAMP-Detektionsassay
für die Pharma- und Biotech-Forschung
Neue Möglichkeiten für HTS-Laboratorien im cAMP-Screening
|
SBS2008 Tutorial (PDF) (1.5MB)
|
Ihre Vorteile
|
|
|
|
|
Technische Fortschritte
|
|
|
|
| Unterdrückung von Compound-/Hintergrundfluoreszenz | |
| Gutes Signal-Rausch-Verhältnis | |
| Großer Dynamikbereich | |
| Gute Linearität | |
|
|
| Reagenzien-Zugabe in einem Schritt spart Aufwand und Zeit | |
| Farbkodierte Reagenzien | |
|
|
| Unempfindlich gegenüber divalenten Kationen (Mg2+, Mn2+) und Chelatbildnern (EDTA, EGTA) | |
| Unempfindlich gegenüber hohen ATP-Konzentrationen | |
| Zellbasierter Assay, auch für Membran-Präparationen geeignet | |
|
|
| Signal kann nach bis zu 24 h gemessen werden (Raumtemperatur) | |
| Fertige Arbeitslösung ist stabil bei 4 °C für mindestens zwei Monate | |
|
|
| Theoretische and praktische Unterstützung, die Lösungen zu technischen Fragen und die Anpassung des Tests an individuelle Anforderungen umfasst | |
zum Seitenanfang
Assay-Prinzip
Test-Anforderungen
| Anregung | 456 nm, Nanosekunden-Lichtimpulse |
| Emission Donor-Kanal | 620..630 nm, Integrationszeit 3500 ns, Delay 1500 ns |
| Emission Akzeptor-Kanal | 700..730 nm, Integrationszeit 300 ns, Delay 200 ns |
zum Seitenanfang
Experimentelle Daten
zum Seitenanfang
Kit-Design
5000 Datenpunkte und
44000 Datenpunkte
Ein Datenpunkt ist als Zugabe von 10 µl der fertigen Arbeitslösung definiert
(Gesamtvolumen pro Well: 30 µl).
Kit-Inhalt
| Beschreibung | Flaschen-/Gefäß-Farbe | Versand-/Aufbewahrungsbedingungen |
| 1. Ru-cAMP-Lösung | Gefäß mit rotem Deckel in Aluminium-Behälter | -20°C/-20°C |
| 2. anti-cAMP-IgG-AlexaFluor-700-Lösung | Gefäß mit blauem Deckel in Aluminium-Behälter | -20°C/-20°C |
| 3. 3x Lysis-Puffer | Polyethylen-Flasche | -20°C/-20°C |
und den in-vitro-Gebrauch geeignet.
Er ist nicht für den Gebrauch zu diagnostischen Zwecken geeignet.
zum Seitenanfang
Assay-Protokoll
|
|
Fügen Sie die beiden Assay-Komponenten zum 3x Lysis-Puffer hinzu.
 |
|
|
|
Fügen Sie die vorbereitete cAMP-Nano-TRF-Arbeitslösung zu Ihren Testgefäßen hinzu.
 |
|
|
|
| Ein Teil der cAMP-Nano-TRF-Arbeitslösung (10 µl) wird zu zwei Teilen des HTS-Reaktionsgemischs (20 µl) gegeben.
Der Übergang zu kleineren Volumina ist möglich, wenn dieses Mischungsverhältnis eingehalten wird. |
|
zum Seitenanfang
Warenzeichen
CAMP-NANO-TRF ist ein Warenzeichen von Roche. Andere Marken oder Produktnamen sind Warenzeichen der jeweiligen Eigentümer.
zum Seitenanfang
Disclaimer
zwischen Molecular Probes, Inc., einer hundertprozentigen Tochtergesellschaft der Invitrogen Corporation,
und Roche Diagnostics GmbH. Die Herstellung, der Gebrauch, der Verkauf oder der Import dieser Komponente
oder ihrer Konjugate oder Kombinationen daraus ist Gegenstand eines oder mehrerer angemeldeter US-Patente
oder ihrer entsprechenden internationalen Äquivalente, die Eigentum von Molecular Probes, Inc. sind.
Durch den Kauf dieses Produkts erwirbt der Käufer das nicht-übertragbare Recht zum Einsatz dieses Produkts
für Forschungszwecke zur Ausführung von TR-FRET-Assays (einschließlich HTS-Assays),
einschließlich Auftragsforschungs-Dienstleistungen zur Ausführung von TR-FRET Assays (einschließlich HTS-Assays).
Der Käufer darf das Produkt an eine dritte Seite zu anderen als Forschungszwecken weder verkaufen noch anderweitig
übertragen. Informationen über den Erwerb einer Lizenz zum Gebrauch dieses Farbstoffs AlexaFluor 700 zu anderen
als den vorgenannten Zwecken sind erhältlich über
Molecular Probes, Inc., Business Development,
29851, Willow Creek Road, Eugene, OR 97402-9132.
Tel: +1 (541) 465-8300. Fax: +1 (541) 335-0504.
zum Seitenanfang
| cAMP Assay |
|